Pour que les structures tissulaires des échantillons biologiques soient facilement reconnaissables au microscope électronique, ils sont traités avec un agent de coloration. L’agent de coloration standard pour cela est l’acétate d’uranyle. Cependant, certains laboratoires ne sont pas autorisés à utiliser cette substance hautement toxique et radioactive pour des raisons de sécurité.
Une équipe de recherche de l’Institut de microscopie électronique et de nanoanalyse (FELMI-ZFE) de l’Université de technologie de Graz (TU Graz) a maintenant trouvé une alternative écologique : l’espresso ordinaire. Les images des échantillons traités avec celui-ci étaient d’aussi bonne qualité que les images des échantillons comparatifs, qui ont été préparés avec de l’acétate d’uranyle. Les chercheurs ont publié leurs résultats dans la revue Méthodes.
Les taches de café comme inspiration
« J’ai eu l’idée d’utiliser l’espresso comme agent de coloration en voyant les taches circulaires séchées dans les tasses de café usagées », explique Claudia Mayrhofer, responsable de l’ultramicrotomie à l’institut. Pendant la préparation, elle découpe les échantillons de tissu en tranches ultra-minces et les fixe sur des porte-échantillons. La coloration est la dernière étape avant l’examen au microscope électronique. « Les tests initiaux ont montré que le café colore les échantillons biologiques et améliore les contrastes », souligne Mayrhofer.
Avec la chef d’équipe Ilse Letofsky-Papst et l’étudiant diplômé Robert Zandonella, Claudia Mayrhofer a étudié la performance de l’espresso en comparaison directe avec l’acétate d’uranyle. Dans des conditions identiques, ils ont traité des coupes ultra-minces de mitochondries avec divers agents de coloration et ont évalué la qualité des images au microscope à l’aide d’un logiciel d’analyse d’image spécial. « L’espresso a fourni des valeurs de contraste comparativement très bonnes, dans certains cas elles étaient même meilleures qu’avec l’acétate d’uranyle », explique Claudia Mayrhofer.
Des tests supplémentaires sur différents types de tissus nécessaires
Ilse Letofsky-Papst conclut : « Nos résultats montrent que le café est une alternative sérieuse à l’acétate d’uranyle. Cependant, des investigations supplémentaires sur différents types de tissus sont encore nécessaires pour permettre une application large en microscopie électronique pour les sciences de la vie. »
Article : Coffee – a ubiquitous substitute for uranyl acetate in staining of biological ultrathin sections for electron microscopy studies – Journal : Methods – Méthode : Experimental study – DOI : Lien vers l’étude
Source: GRAZ UT
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